淺談離心時間對分離效果的影響
發(fā)布時間:2015-10-9 16:12:51??????點擊:
對于離心機的分離效果,我們常常會考慮離心機種類,離心方法,離心介質等因素,但是在實際操作中,除了以上幾點,離心機轉速和離心時間以及離心介質的PH值和溫度等條件也是很重要的,下面小編就為大家詳細介紹一下后面三種因素對于分離效果的影響。
1、離心時間
離心時間是影響離心效果十分重要的一個因素,離心方法的不同所需要的離心時間也會不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,詳細介紹。對于差速離心來說,離心時間指的是某種顆粒完全沉降到離心管底的時間;而對于等密度梯度離心來說,離心時間則是指顆粒完全到達等密度點的平衡時間;最后一個密度梯度離心的離心時間指的是形成界限分明的區(qū)帶的時間。對于后面兩種離心方法,其所需的區(qū)帶形成時間或平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗后確定。
2、離心轉速
離心機的轉速的大小主要由轉子的轉速和顆粒的旋轉半徑來決定,在說明離心條件時,往往也用相對離心力場來表示。實際工作中,離心力場的數(shù)據(jù)是指其平均值。即是指在離心溶液中點處顆粒所受的離心力場。
3、離心介質的PH值和溫度
離心介質的PH值的設定一般是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內,可采用緩沖液,在試驗過稱重,要避免過酸或者過堿的環(huán)境對離心機本身產生腐蝕作用。
我們在利用離心機工作時,除了要格外注意對離心介質的選擇之外,還要控制好溫度及介質溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質的凝集、變性和失活。一般來說,我們將離心溫度會控制在4℃左右,對于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,離心也可在室溫下進行。
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1、離心時間
離心時間是影響離心效果十分重要的一個因素,離心方法的不同所需要的離心時間也會不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,詳細介紹。對于差速離心來說,離心時間指的是某種顆粒完全沉降到離心管底的時間;而對于等密度梯度離心來說,離心時間則是指顆粒完全到達等密度點的平衡時間;最后一個密度梯度離心的離心時間指的是形成界限分明的區(qū)帶的時間。對于后面兩種離心方法,其所需的區(qū)帶形成時間或平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗后確定。
2、離心轉速
離心機的轉速的大小主要由轉子的轉速和顆粒的旋轉半徑來決定,在說明離心條件時,往往也用相對離心力場來表示。實際工作中,離心力場的數(shù)據(jù)是指其平均值。即是指在離心溶液中點處顆粒所受的離心力場。
3、離心介質的PH值和溫度
離心介質的PH值的設定一般是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內,可采用緩沖液,在試驗過稱重,要避免過酸或者過堿的環(huán)境對離心機本身產生腐蝕作用。
我們在利用離心機工作時,除了要格外注意對離心介質的選擇之外,還要控制好溫度及介質溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質的凝集、變性和失活。一般來說,我們將離心溫度會控制在4℃左右,對于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,離心也可在室溫下進行。
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